- LB agar plate에서 배양되어 single colony 형성한 박테리아를 selection 하기 위함이다.
이후 이들 colony는 대량생산 하고자 하는 plasmid를 prep 하기 위해 배양되어진다.
1. LB agar plate에 형성된 single colony를 멸균 팁을 이용하여 colony만을 따낸다.
이때, 확실하게 colony를 따기 위해서 agar 배지까지 같이 따는게 좋다.
2. colony가 따진 팁을 5ml의 LB media가 들어있는 tube에 팁 전체를 넣는다.
이때, 파이펫팅을 통해 팁에 묻은 colony를 전부 풀어준다는 느낌으로 수행한다.
3. tube의 뚜껑을 닫아주나 꽉 닫지 않고 살짝 풀어준다.
4. Shaking incubator에서 37℃·overnight incubation 해준다.
5. 다음날 media를 확인하였을 때 뿌옇게 변해있는지 확인한다.
* 2번 과정에 사용된 media에는 경우에 따라 항생제가 포함될 수도 있다.
Single colony isolation
Single colony isolation
- LB agar plate에서 배양되어 single colony 형성한 박테리아를 selection 하기 위함이다.
이후 이들 colony는 대량생산 하고자 하는 plasmid를 prep 하기 위해 배양되어진다.
1. LB agar plate에 형성된 single colony를 멸균 팁을 이용하여 colony만을 따낸다.
이때, 확실하게 colony를 따기 위해서 agar 배지까지 같이 따는게 좋다.
2. colony가 따진 팁을 5ml의 LB media가 들어있는 tube에 팁 전체를 넣는다.
이때, 파이펫팅을 통해 팁에 묻은 colony를 전부 풀어준다는 느낌으로 수행한다.
3. tube의 뚜껑을 닫아주나 꽉 닫지 않고 살짝 풀어준다.
4. Shaking incubator에서 37℃·overnight incubation 해준다.
5. 다음날 media를 확인하였을 때 뿌옇게 변해있는지 확인한다.
* 2번 과정에 사용된 media에는 경우에 따라 항생제가 포함될 수도 있다.
'Biology > protocol' 카테고리의 다른 글