Transformation - 원하는 유전자가 삽입된 plasmid vector를 박테리아에 도입하는 것을 말한다. 이러한 박테리아를 competent cell이라고 부르며, 주로 투과성이 좋은 세포벽을 가진 E.coli를 사용한다. 이 후에는 형질전환 된 박테리아를 대량배양하여 추후 원하는 유전자가 삽입된 plasmid vector만을 대량 얻어낼 수 있다. 1. 사전에 water bath를 42℃로 맞추어 둔다. (Heat shock을 위함.) 2. plasmid와 competent cell을 꺼내어 ice에 박은 상태로 녹여준다. 3. plasmid 0.5ul과 competent cell 100ul을 넣어 파이펫팅으로 섞어준다. 4. 3번의 sample을 ice에서 3-40분 가량 incubatio..
Biology/protocol 2021. 1. 6. 17:55
Transformation - 원하는 유전자가 삽입된 plasmid vector를 박테리아에 도입하는 것을 말한다. 이러한 박테리아를 competent cell이라고 부르며, 주로 투과성이 좋은 세포벽을 가진 E.coli를 사용한다. 이 후에는 형질전환 된 박테리아를 대량배양하여 추후 원하는 유전자가 삽입된 plasmid vector만을 대량 얻어낼 수 있다. 1. 사전에 water bath를 42℃로 맞추어 둔다. (Heat shock을 위함.) 2. plasmid와 competent cell을 꺼내어 ice에 박은 상태로 녹여준다. 3. plasmid 0.5ul과 competent cell 100ul을 넣어 파이펫팅으로 섞어준다. 4. 3번의 sample을 ice에서 3-40분 가량 incubatio..