Midi-prep - DNA와 plasmid의 형태구조 차이를 이용하여 원하는 Plasmid DNA를 정제하기 위함이다. 정제하고자 하는 plasmid DNA는 사전에 박테리아에 transformation 되어 배양되었다. plasmid DNA를 정제하기 위해 해당 글에선 Qiagen의 Kit (12943)를 사용하였다. 사전에 transformation 된 박테리아는 100ml의 media에 배양되어졌다. 1. 배양된 박테리아를 4℃·6000xg·15min 조건에서 centrifuge를 수행한다. (만약 이들을 보관하고자 한다면 상층액은 버리고 pellet만을 -70℃에 보관한다.) 2. 상층액은 버리고 pellet이 딸려가지 않게끔 조심한다. 3. Kit에 포함된 P1 buffer을 4ml 넣고 볼텍..
Biology/protocol 2021. 1. 11. 16:17
Midi-prep - DNA와 plasmid의 형태구조 차이를 이용하여 원하는 Plasmid DNA를 정제하기 위함이다. 정제하고자 하는 plasmid DNA는 사전에 박테리아에 transformation 되어 배양되었다. plasmid DNA를 정제하기 위해 해당 글에선 Qiagen의 Kit (12943)를 사용하였다. 사전에 transformation 된 박테리아는 100ml의 media에 배양되어졌다. 1. 배양된 박테리아를 4℃·6000xg·15min 조건에서 centrifuge를 수행한다. (만약 이들을 보관하고자 한다면 상층액은 버리고 pellet만을 -70℃에 보관한다.) 2. 상층액은 버리고 pellet이 딸려가지 않게끔 조심한다. 3. Kit에 포함된 P1 buffer을 4ml 넣고 볼텍..