Lentivirus production - 미지의 단백질을 KO 또는 O/E를 유도하는 viral을 생산하여 세포주에 transduction 시키기 위함. Lentivirus를 만들기 위해 plasmid vector (PLP1, PLP2, VSV-G)가 필요하다. 293FT 세포주를 사용하였으며 PEI를 이용한 transfection을 통해 렌티바이러스를 생산하였다. 1. Sample 당 PLP1, 2 (1.5ug) VSV-G (3ug), target Protein plasmid (2ug)이 필요하다. 2. 각각의 plasmid의 양을 참고하여 EP tube에 넣어주고, Opti-MEM 500ul을 넣어 suspension 한다. 3. Sample 당 PEI 24ul, Opti-MEM 500ul이 필요하..
Biology/protocol 2021. 1. 11. 19:17
Lentivirus production - 미지의 단백질을 KO 또는 O/E를 유도하는 viral을 생산하여 세포주에 transduction 시키기 위함. Lentivirus를 만들기 위해 plasmid vector (PLP1, PLP2, VSV-G)가 필요하다. 293FT 세포주를 사용하였으며 PEI를 이용한 transfection을 통해 렌티바이러스를 생산하였다. 1. Sample 당 PLP1, 2 (1.5ug) VSV-G (3ug), target Protein plasmid (2ug)이 필요하다. 2. 각각의 plasmid의 양을 참고하여 EP tube에 넣어주고, Opti-MEM 500ul을 넣어 suspension 한다. 3. Sample 당 PEI 24ul, Opti-MEM 500ul이 필요하..